Икона считалась одной из главных святынь Покровского храма (церкви Покрова Богородицы Покровского монастыря в Суздале). Содержанием ее является воплощение и утверждение истинности догмата о троичности Бога. Смысловым, идейным и композиционным центром является средник иконы — изображение Святой Троицы в образе трех ангелов. Иконография средника восходит к "Троице" преподобного Андрея Рублева, ставшей в эту эпоху своеобразным эталоном для иконописцев.

В клеймах иконы дана развернутая картина мира в его главных событиях, описанных в Книге Бытия и толкованиях на нее. Содержание клейм основано на тексте Толковой Палеи, из которой выбраны сюжеты, разъясняющие сущность догмата о Святой Троице. Подобные иконы, изображающие "деяния" Троицы, получили распространение во второй половине XVI века. По-видимому, все они в той или иной степени следовали образцу, созданному для Благовещенского собора Московского Кремля после опустошительного пожара 1547 года.